不同煎煮时间的银翘散对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响

　　

目的 为分析不同煎煮时间银翘散对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖的影响。方法 首先建立不同煎煮时间（0、1.5、3、4.5、6min）银翘散中三种主要成份（绿原酸、连翘苷、牛蒡子苷）的高效液相色谱，使用Innoval ODS-2柱（4.6mm×150mm;5um）,以甲醇（A）-0.05%磷酸水（B）为流动相梯度洗脱，在波长237nm检测不同煎煮时间银翘散中三种主要成份，流速1.0ml/min。其次将小鼠连续15天腹腔注射环磷酰胺（60 mg/kg），在无菌操作下分离小鼠脾脏，制备脾脏细胞并用含10%胎牛血清蛋白的RPMI 1640培养，调整细胞浓度（2.0×10^6）分别加入诱导剂刀豆蛋白（ConA）和脂多糖（LPS）以及不同煎煮时间银翘散，经24h培养后，采用MTT法检测T和B淋巴细胞增殖。银翘散与ConA共同影响免疫抑制小鼠脾脏T淋巴细胞的增殖，在1.5min时最佳；与LPS共同影响免疫抑制小鼠脾脏B淋巴细胞的增殖，在3min时最佳。结果表明：银翘散煎煮时间不同所含成分含量有所差异，对T、B淋巴细胞影响不同。

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