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液相色谱流动相的选择经验
液相色谱流动相的选择经验
王亚栋
(河北省沧州旭阳化工有限公司,沧州市黄骅港,061113)
摘 要:液相色谱流动相的选择方法
关键词:流动相,选择经验
1 关于液相色谱仪紫外检测器中分析波长的选择应该遵循的原则
1.1你的分析目的,也就是你的目标组分是什么,是主要组分还是杂质组分。
1.2确定目标组分之后,一般选择目标组分的特征波长。按照朗伯-比尔定律来说只有在特征波长处的吸光度才可以和浓度成正比关系。
1.3确定了特征吸收波长之后,根据灵敏度的不同来选择是选择最灵敏度线还是选择次灵敏度线。有时有的组分灵敏度过高,会造成标准曲线的弯曲,所以要选择次灵敏度线。
1.4确定了吸收波长之后,根据样品的实际情况来选择定量方法。
2 选择液体物质的吸收波长最好是在246nm,甲醇,乙腈等吸收波长都在190nm左右了,如果选择210nm的液体物质则相对波长距离太近,那么仪器的平衡时间就长了,如果非要选用210nm,检测环境一定要稳定才行(不知道你是怎样定量,其他物质在246处是否都出峰呢?)。
3 如果最大吸收波长处的干扰过大,那么选择肩峰位置的吸收波长是可行的(很多文献都提到就是这么处理的)。
4 分析你使用的流动相有哪些成分,经常使用的甲醇,乙腈和水在此波长下是没有紫外吸收的,我经常使用210nm这个波长测定物质含量.在低波长基线不大稳,干扰比较大的情况我也遇到过,在低波长下好多物质都有吸收,经常出现很多未知峰.有的检测器氘灯使用一段时间后,在低波长下检测也会出现上述情况,如果换到高波长基线就好许多(我觉得你应该再去系统的尝试一下)。
5 人们往往要求在最佳条件下的吸收波长检测,但不一定是最大吸收波长(最适合的才是最好的)。
6 DAD收集200-400(700)nm全部数据,分别进空白和标准样品,三维谱图可以清晰地帮助你选择吸收波长。原则是:干扰物吸收尽量小,目标物尽量吸收尽量大!
(推荐 326nm和276nm 。同时采集就可以啦,分别能得到分辨率高的色谱图!只要标准样品和试样在同样的采集参数下测试,对于结果的测定是没有什么影响的!)
以上总结纯属个人工作经验,并无参考文献,转载通知作者。
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