
文章简介
HPLC法测定鹿骨胶中氨基酸含量
摘要:目的:建立鹿骨胶中氨基酸含量的测定方法。方法:样品经异硫氰酸苯酯柱前衍生化,采用高效液相色谱法(HPLC)测定鹿骨胶中氨基酸含量,Gemini® C18(110Å)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 µm),以乙腈-0.1 mol/L醋酸钠溶液(用醋酸调节pH值至6.5)(7:93)为流动相A,以乙腈-水(4:1)为流动相B,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为43 ℃。结果:以L-羟脯氨酸计,L-羟脯氨酸在11.88~74.24 µg/mL范围内有良好的线性关系,回归方程为Y=2.0×106X+680.07,相关系数R2 =1.000 0;L-羟脯氨酸 、甘氨酸 、 丙氨酸 、L-脯氨酸 的回收率分别为98.1%~100.9%、98.3%~102.9%、98.2%~102.7%、99.2%~100.8%。结论:该方法准确、灵敏、简便、重复性好,可作为鹿骨胶中氨基酸含量质量控制的有效方法。
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