注射用唑来膦酸浓溶液配伍稳定性考察

许俊博，赵海英，尚淑霞，寇同欣，金珠，刘茜英，贾小兰，金鑫

（华润双鹤药业股份有限公司，北京 101111）

摘要 目的 考察不同稳定性条件下放置的注射用唑来膦酸浓溶液与不同溶媒配伍后的溶液稳定性。方法 将注射用唑来膦酸浓溶液0时和效期末样品分别与葡萄糖注射液、氯化钠注射液配伍，在冷藏（2～8℃）放置 24 h、室温30℃放置6h条件下，以性状、不溶性微粒、pH、渗透压、5-羟甲糠醛、可见异物、含量及有关物质（包含阴离子杂质）等指标来考察配伍溶液的稳定性。结果 不同稳定性条件下放置的样品配伍后的溶液性状、不溶性微粒、pH、渗透压、5-羟甲糠醛、可见异物、含量及有关物质（包含阴离子杂质）等指标均未发生显著变化。结论 不同稳定性条件下注射用唑来膦酸浓溶液的样品配伍时，在冷藏（2～8℃）放置 24 h、室温下放置6h相对稳定，说明注射用唑来膦酸浓溶液与葡萄糖注射液、氯化钠注射液相容性良好，可满足临床使用要求。

关键词 唑来膦酸；配伍稳定性；含量；有关物质

Study on Compatibiliy Stability of Zoledronic Acid Concentrated Solution for Injection

XU Junbo, ZHAO Haiying, SHANG Shuxia, KOU Tongxin, JIN Zhu，LIU Qianying，JIAXiaolan（China Resources Double-Crane Pharmaceutical Co.,Ltd, Beijing 100120, China）

ABSTRACT Objective Study the stability of concentrated solutions of zoledronic acid for injection placed under different stability conditions in combination with different solvents. Methods Mix the concentrated solution of zoledronic acid for injection with glucose injection and sodium chloride injection at 0 and the end of the efficacy period, respectively. Under the conditions of refrigeration (2-8 ℃) for 24 hours and room temperature of 30 ℃ for 6 hours, evaluate the stability of the compatible solution based on its properties, insoluble particles, pH, osmotic pressure molar concentration, 5-hydroxymethylfurfural, visible foreign matter, content, and related substances (including anionic impurities). Results The properties of the solution, insoluble particles, pH, osmotic pressure molar concentration, 5-hydroxymethylfurfural, visible foreign matter, content, and related substances (including anionic impurities) did not show significant changes after the compatibility of samples placed under different stability conditions. Conclusion When the samples of concentrated solution of zoledronic acid for injection are mixed under different stability conditions, they are relatively stable when stored in refrigeration (2-8 ℃) for 24 hours and at room temperature for 6 hours. This indicates that the compatibility of concentrated solution of zoledronic acid for injection with glucose injection and sodium chloride injection is good and can meet the clinical requirements.

KEY WORDS Zoledronic acid; Compatibility stability; Content determination; Relatedsubstances

中图分类号 R974.1；R927.11

文献标识码 B

注射用唑来膦酸浓溶液（Zoledronic Acid Concentrated Solution for Injection），商品名是择泰（Zometa），其规格为5ml：4mg，由诺华公司开发的第三代双膦酸盐药物，临床上用于缓解肿瘤的骨转移，降低骨折和其他相关事件的发生率［1,2］。唑来膦酸上市十几年来，因抗骨吸收活性更强，临床使用剂量最小，药效持续时间最长，患者依从性好，使用安全，是临床实践中使用和研究最广泛的双膦酸盐药物，具有良好的临床应用前景[3,4]。临床上将本品1支加入100ml的0.9%氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液中，采用静脉滴注给药，因此需进行使用过程配伍溶液的稳定性考察。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Waters 2695-2487 高效液相色谱仪（美国waters公司）；Thermo DIONEX ICS-5000（美国赛默飞公司）；UV-2600紫外-可见分光光度计（日本岛津公司）；MSA224S-1CE-DU 电子分析天平（德国赛多利斯科学仪器公司）；TM S470-K pH计（梅特勒-托利多公司）；SMC 30D渗透压仪（天津天河公司）；GWF-8JD 不溶性微粒仪（天津天河公司）； YB-2型澄明度仪（天津精拓仪器科技有限公司）。

1.2 试药

唑来膦酸对照品（USP，批号：R05910）、咪唑乙酸对照品（USP，批号R006D0）、磷酸标准物质（1000mg/L）（国防科技化学一级计量站，批号：GBW(E)080524）、亚磷酸对照品（西格玛奥德里奇公司，批号：MKBV9044V）、5-羟甲糠醛对照品（LGC公司，批号： G991107）、磷酸氢二钠（国药化学试剂公司，批号：20190219）、四己基硫酸氢铵（西格玛奥德里奇公司，批号：BCCH3613）、依地酸二钠（国药化学试剂公司，批号：20190423）、氢氧化钠（国药化学试剂公司，批号：20200323）、乙腈（MREAD公司，批号：018431）、水（MilliQ）、注射用唑来膦酸浓溶液（华润双鹤药业股份有限公司，批号：P1611011、P1908011）、5%葡萄糖注射液（华润双鹤药业股份有限公司，批号：F201907163）、0.9%氯化钠注射液（华润双鹤药业股份有限公司，批号：G191271）。

2方法与结果

2.1 色谱条件

2.1.1含量和有关物质

色谱柱Phenomenex RP-18，4.6mm×250mm，5µm；流速：1.0ml/min；柱温：室温；检测波长：215nm；流动相：磷酸氢二钠溶液（磷酸氢二钠10.53g，四己基硫酸氢铵5.4g，加800ml水溶解，加乙腈200ml与依地酸二钠溶液2ml，用氢氧化钠溶液（2mol/L）调节pH值至7.6）。

2.1.2磷酸盐和亚磷酸盐

色谱柱DionexIonPac AS18-4µm，4×150mm (Thermo)；流速：0.7ml/min；柱温：室温；电导检测器；流动相A：水，流动相B：氢氧化钾溶液（50mmol/L），按照下表进行梯度洗脱。

表1 梯度洗脱条件

Tab．1 Conditions of gradient elution

时间（分钟） 流动相A（%） 流动相B（%）

0 72 28

10 72 28

10.1 25 75

18 25 765

18.1 5 95

25 5 95

25.1 72 28

30 72 28

2.1.3 5-羟甲糠醛

在284nm波长处测定吸光度A。

2.2 溶液制备

2.2.1 含量用对照品溶液

取唑来膦酸对照品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成含量用对照品溶液（0.04mg/ml）。

2.2.2 有关物质测定用对照品溶液

取咪唑乙酸对照品和唑来膦酸对照品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成有关物质测定用对照品溶液（咪唑乙酸0.16μg/ml和唑来膦酸0.16μg/ml）。

2.2.3 磷酸盐和亚磷酸盐测定用对照品溶液

精密量取磷酸标准物质溶液和精密称取亚磷酸对照品适量，加水溶解并稀释制成磷酸盐和亚磷酸盐测定用对照品溶液（磷酸盐0.04μg/ml和亚磷酸盐0.04μg/ml）。

2.2.4 5-羟甲糠醛测定用对照品溶液

取5-羟甲糠醛对照品适量，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml中含2.5μg的溶液，作为5-羟甲糠醛对照品溶液。

2.2.5供试品溶液

在100毫升0.9%氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液中加入本品1支，制成配伍研究用样品溶液。

精密量取配伍样品供试品溶液2ml，置10ml容量瓶中，加水稀释至刻度，制成5-羟甲糠醛测定用供试品溶液。

2.3 结果

取在不同稳定性条件（0时、近效期）下放置的注射用唑来膦酸浓溶液（批号P1611011（效期末）、P1908011（零时）分别与0.9%氯化钠注射液和5%葡萄糖注射液进行配伍。

2.3.1性状和可见异物、不溶性微粒

冷藏24 h和室温6h条件下，0.9%氯化钠注射液和5%葡萄糖注射液与0时及近效期样品配伍溶液无色澄清，放置前后颜色无明显变化，不溶性微粒基本无变化。

2.3.2 pH和渗透压

冷藏24h和室温6h条件下，0.9%氯化钠注射液和5%葡萄糖注射液与0时及近效期样品的pH值和渗透压相对稳定。

2.3.3有关物质和磷酸盐及亚磷酸盐

0.9%氯化钠注射液与0时及近效期样品配伍时有关物质和磷酸盐及亚磷酸盐在冷藏24 h及室温6h内均未检出。

5%葡萄糖注射液与0时样品配伍时有关物质和亚磷酸在冷藏24 h和室温6h内均未检出，磷酸盐有检出，近效期样品的配伍溶液亚磷酸均未检出，有关物质和磷酸盐在冷藏24 h和室温6 h内，单个杂质及杂质总量有检出，未有增长。

2.3.4 5-羟甲糠醛

冷藏24 h及室温6h条件下，5%葡萄糖注射液与0时及近效期样品配伍时，5-羟甲糠醛相对稳定。

2.3.5含量

冷藏24h和室温6h条件下，0.9%氯化钠注射液和5%葡萄糖注射液与0时及近效期样样品含量相对稳定，且符合规定。

表 2 与5%葡萄糖注射液配伍溶液稳定性结果（批号：P1908011，0时）

考察项目 冷藏（2℃~8℃） 室温（30℃）

0h 3h 6h 9h 24h 0h 3h 6h

pH值 6.36 6.36 6.38 6.36 6.37 6.36 6.36 6.37

渗透压（mOsmol/kg） 276 276 280 280 281 280 276 280

有关物质（%） 咪唑乙酸 — — — — — — — —

未知杂质 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03

杂质总量 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03

磷酸盐及亚磷酸盐（%） 磷酸盐 0.004 0.006 0.007 0.007 0.003 0.003 0.006 0.009

亚磷酸盐 — — — — — — — —

不溶性微粒 ≥10μm 0.1 0.2 0.1 0.4 0.2 0.3 0.4 0.2

≥25μm 0.1 0.1 0.0 0.0 0.0 0.0 0.1 0.1

5-羟甲糠醛（µg/ml） 1.04 1.04 1.05 1.04 1.05 1.05 1.05 1.04

含量（%） 99.73 100.2 100.1 100.1 100.4 100.1 100.2 100.3

Tab.2 Stability results of compatibility solution with 5% glucose injection(Batch Number: P1908011，0month)

表 3 与0.9%氯化钠注射液配伍溶液稳定性结果（批号：P1908011，0时）

Tab.3 Stability results of the combination solution with 0.9% sodium chloride injection(Batch Number: P1908011，0month)

考察项目 冷藏（2℃~8℃） 室温（30℃）

0h 3h 6h 9h 24h 0h 3h 6h

pH值 6.01 6.01 5.98 5.98 5.98 6.01 6.01 6.00

渗透压（mOsmol/kg） 306 301 300 302 300 300 300 300

有关物质（%） 咪唑乙酸 — — — — — — — —

未知杂质 — — — — — — — —

杂质总量 — — — — — — — —

磷酸盐及亚磷酸盐（%） 磷酸 — — — — — — — —

亚磷酸 — — — — — — — —

不溶性微粒 ≥10μm 0.1 0.3 0.3 0.5 0.4 0.2 0.3 0.3

≥25μm 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.0 0.1 0.0

含量（%） 98.03 98.16 98.06 97.92 98.48 98.00 98.09 98.23

表 4 与5%葡萄糖注射液配伍溶液稳定性结果（批号：P1611011，近效期）

Tab.4 Stability results of compatibility solution with 5% glucose injection (Batch Number:P1611011, 0month)

考察项目 冷藏（2℃~8℃） 室温（30℃）

0h 3h 6h 9h 24h 0h 3h 6h

pH值 6.35 6.34 6.35 6.36 6.40 6.34 6.35 6.33

渗透压（mOsmol/kg） 281 283 283 282 281 282 282 282

有关物质（%） 咪唑乙酸 — — — — — — — —

未知杂质 — — — — — — — —

杂质总量 — — — — — — — —

磷酸盐及亚磷酸盐（%） 磷酸 0.024 0.022 0.021 0.022 0.026 0.034 0.035 0.036

亚磷酸 — — — — — — — —

不溶性微粒 ≥10μm 0.2 0.2 0.3 0.7 0.4 0.5 0.3 0.2

≥25μm 0.1 0.2 0.0 0.1 0.1 0.1 0.0 0.0

5-羟甲糠醛（µg/ml） 1.05 1.08 1.06 1.06 1.06 1.05 1.05 1.04

含量（%） 103.4 103.4 103.4 103.4 103.3 103.5 103.4 103.4

表5 与0.9%氯化钠注射液配伍溶液稳定性结果（批号：P1611011，近效期）

Tab.5 Stability results of the combination solution with 0.9% sodium chloride injection(Batch Number: P1611011，24month)

考察项目 冷藏（2℃~8℃） 室温（30℃）

0h 3h 6h 9h 24h 0h 3h 6h

pH值 6.00 5.97 5.96 5.96 6.00 5.99 5.99 5.99

渗透压（mOsmol/kg） 294 294 294 293 296 294 294 293

有关物质（%） 咪唑乙酸 — — — — — — — —

未知杂质 — — — — — — — —

杂质总量 — — — — — — — —

磷酸盐及亚磷酸盐（%） 磷酸 — — — — — — — —

亚磷酸 — — — — — — — —

不溶性微粒 ≥10μm 0.1 0.3 0.3 1.0 0.2 0.2 0.1 0.3

≥25μm 0.1 0.1 0.1 0.1 0.0 0.1 0.0 0.0

含量（%） 98.80 99.27 99.60 99.94 100.0 100.1 100.2 100.2

3 讨论

药物使用中稳定性试验的研究用样品制备的规模和批次，在WHO 技术报告第1010 号附件10中［5］要求至少为中试规模2个批次，这些批次中至少包含一批接近货架期终点的样品。NMPA 2023 年8 月28 日发布的《临床试验期间生物制品药学研究和变更技术指导原则（征求意见稿）》［6］明确指出“需配伍使用的制剂，应考察有效期末的配伍稳定性”。文献报道配伍稳定性的样品采用中试及以上规模的批次［7］，且不少于2个批次，其中至少有一个批次是临近货架期的样品。另外，国家药品审评中心（CDE）发布的《化学药品注射剂仿制药质量和疗效一致性评价技术要求》[8] 中：在注射剂稳定性试验研究过程需开展配伍稳定性试验，以确保产品临床配伍过程中的质量安全。故选取两批中试规模样品，其中一批选择0时样品，一批为临效期样品。

在灭菌过程中葡萄糖注射液的主成分葡萄糖会降解产生5-羟甲糠醛，5-羟甲糠醛量超过一定浓度会对对人体肌肉和器官的损伤和神经毒性；所以在葡萄糖制剂中作为一种重要杂质需对其进行控制[10]。依据文献[11]，药物与葡萄糖注射液进行配伍时，化学项目可根据性质进行5-羟甲糠醛测定。故考察唑来膦酸浓溶液与葡萄糖配伍溶液中考察5-羟甲糠醛是否变化，在本研究中5-羟甲糠醛均未超过规定限度，说明唑来膦酸与葡萄糖注射液配伍，稳定性考察期间不会对其降解产生任何影响。

唑来膦酸为第三代双膦酸盐药物，化合物较稳定，仅在强降解（高温、光照、强酸、强碱、氧化）条件下，产生咪唑乙酸和磷酸两个降解杂质。配伍试验考察过程中，咪唑乙酸在配伍溶液中无变化。磷酸在葡萄糖溶液中可以检测到，远低于标准限度，在配伍后稳定性样品中磷酸并未增长，符合临床用药要求。说明氯化钠注射液或葡萄糖注射液分别与唑来膦酸配伍，不会对唑来膦酸的有关物质产生影响。

华润双鹤生产的注射用唑来膦酸浓溶液的内包装为聚丙烯安瓿，属半透性包材，在稳定性放置过程中含量会略有升高，0时含量会略低于临效期样品含量（均在标准规定范围内），故配伍溶液的含量趋势也是0时样品配伍后的唑来膦酸含量略低于临效期样品的配伍溶液唑来膦酸含量，但均在质量标准规定限度内。

注射用唑来膦酸浓溶液0时及临效期样品分别与5%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液配伍后，在冷藏（2～8℃）、室温下放置 24 h，其配伍溶液性状、不溶性微粒、pH、渗透压、5-羟甲糠醛、可见异物、唑来膦酸含量及有关物质（包含阴离子杂质）相对稳定。说明本品与葡萄糖注射液、氯化钠注射液配伍时相容性良好，不会影响唑来膦酸及配伍溶液的质量和稳定性。

综上所述，注射用唑来膦酸浓溶液与0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液100ml配伍使用是安全、有效、稳定的，可满足临床用药要求，为临床药品的使用提供数据支持。但药品说明书参考原研说明书，为谨慎起见建议配伍后立即使用。

参考文献

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