目的:本研究旨在应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术、网络药理学和分子对接技术研究杜仲提取物在防治肾间质纤维化(RIF)中的作用机制。方法:第一步,采用UPLC-Q-TOF-MS技术对杜仲提取物的化学成分进行鉴别,借助PubChem数据库及Siwissprediction数据库预测其潜在靶点。第二步,检索,获取并整合来自多个权威数据库(GeneCards、OMIM、DisGeNET、TTD)的RIF的潜在靶点,并联用韦恩图来确定杜仲防治RIF的潜在靶点,以进一步构建蛋白互作(PPI)网络图。第三步,在DAVID数据库里,对GO功能和KEGG通路进行富集分析,并将分析数据通过微生信平台进行可视化展示。第四步,利用Auto Dock Tools对杜仲关键成分和RIF核心靶点进行分子对接。结果:杜仲提取物中的29种有效活性成分被成功筛选出,并确定了96个与RIF相关的交集靶点。并通过PPI网络筛选出的有丝氨酸和苏氨酸激酶AKT(AKT1)、表皮生长因子受体(EGFR)、尿微量白蛋白(ALB)等15个核心靶点为杜仲防治RIF的关键靶点。通过富集分析发现,脂质与动脉粥样硬化、糖尿病并发症中的AGE - RAGE信号通路、Rap1信号通路等都是防治RIF的潜在关键通路。这些通路与炎症、免疫调节、代谢异常等RIF的发病机制密切相关。分子对接结果表明,杜仲提取物主要活性成分如京尼平苷、异绿原酸A、异绿原酸B与GAPDH、ALB、AKT、EGFR等靶点蛋白之间可以结合形成稳定且有效的复合物,进一步证实了杜仲提取物在防治RIF中的潜在疗效。结论:杜仲提取物防治RIF具有多有效成分、多药效靶点、多作用通路的复杂机制,存在潜在的疗效。本研究为杜仲抗RIF的作用机制提供了有价值的认识,为进一步的实验验证和临床应用奠定了基础。
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